ImageJ 对医生来讲最常用的功能是 WesternBlot 量化和细胞计数。不是所有的 WB都需要量化,下面来一步一步学习如何用ImageJ量化Western blot 的条带,希望本文可以帮助到正在做Western blot实验的科研朋友们!
首先下载安装 Image J, 温馨提示软件在网上有下载。安装完 image J ,打开一张要量化的图片如下图:
点击选择方形选框工具,按住左键,在图片上拖动,选择需要分析的条带区域, 如图中黄色方框所示。
点击选择方形选框工具,按住左键,在图片上拖动,选择需要分析的条带区域, 如图中黄色方框所示。
依次选择,如下图,Select First Lane 选项后会出现以上对话框,直接点击YES即可:
当选区出现1表示选择成功:
峰的面积即灰度值,但是这几个峰连在了一起要先把他们分开,点击直线工具, 画直线。
点击选择魔棒工具,然后分别点击每个峰的下方区域,然后就会弹出各个面积的结果,分别与六个条带的灰度值相对应, 表示六个条带所代表的目的蛋白的表达水平。
使用同样的方法也可以对 beta-actin 进行量化,最后通过标准化计算得到该Western Blot 的量化结果。